PRUEBA DE HIBRIDACIÓN DE ÁCIDO NUCLEICO DEL VPH

La muestra se obtiene mediante un cepillo que se introduce en el canal endocervical las células se someten a una solución alcalina desnaturalizante que exponen al material genético después se hace uso de un cóctel de sondas de ARN para los 13 tipos de VPH-AR en presencia de cualquiera de los tipos se forma un híbrido ADN viral-ARN. La hibridación se identifica mediante anticuerpos específicos y la solución quimio-luminiscente, para el revelado de los híbridos se requiere un luminómetro, la lectura final permite reportar la prueba positiva cuando hay emisión de luz o negativa cuando no la hay. 

Figura 1: Detección de VPH mediante el sistema de hibridación:  https://www.diagnosticsnews.com/productos-y-tecnologias/27364-tecnolab-qiagen-deteccion-de-hpv-de-alto-riesgo-mediante-el- sistema-de-captura-de-hibridos

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA 

1. TEST DE VPH EN ESTRATEGIA DE SCREENING PRIMARIO PARA DETECCIÓN DE CÁNCER CERVICO UTERINO [Internet ]. [consultado el 27 de diciembre de 2023]. Disponible : https://www.argentina.gob.ar/sites/default/files/informe-11-test-vph-marzo-2021.pdf 

TÉCNICA DE PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA) PARA LA DETECCIÓN DE CANDIDIASIS HUMANA

TEMA: Nueva reacción en cadena de la polimerasa múltiple para el diagnóstico específico de especies implicadas en la candidiasis humana. 

OBJETIVO: Diseñar y optimizar una técnica de reacción en cadena de la polimerasa múltiple (PCR) considerando parámetros termodinámicos para la detección simultánea de cinco especies de Candida relevantes en la etiología de la candidiasis humana.

MUESTRAS: muestras sanguíneas de pacientes con hemocultivos positivos para Candida spp.

TIPO DE ÁCIDO NUCLÉICO: ADN genómico

EXTRACCIÓN(LISIS, SEPARACIÓN Y PURIFICACIÓN): estuche comercial QIAamp ADN Mini Kit (Qiagen).

GENES A ANALIZAR: se utilizaron la región transcrita interna 2 (ITS2) (AJ249486.1) para C.albicans y la topoisomerasa II (TOPII) para C. parasilopsis(AB049144 .1), C. krusei (AB049139.1), C. tropicalis (ABA049141.1) y C. guillermondii (AB049145.1).

TAMAÑO EN PAR DE BASES: C. albicana(206pb), C. guillermondii(244pb), C.tropicalis(474pb), C.parasilopsis(558pb) y C. krusei(419pb).

 

TIPO DE PCR: PCR múltiple, 30 ciclos.

PASOS:

DESNATURALIZACIÓN: 94 °C durante un minuto.

ALINEAMINETO O UNIÓN DE CEBADORES:53 °C durante 50 segundos.  

EXTENSIÓN: 72 °C durante 80 segundos.

ELECTROFORESIS O VISUALIZACIÓN:

Figura 1: Electroforesis en gel de agarosa al 1.3% de los productos de la PCR múltiple para la identificación de Candida ssp.Marcador de peso Gene Ruler 1kb DNA Ladder (Invitrogen) .

BIBLIOGRAFÍA:

1.

García LT, Luna LJ, Velasco TK, Guerra BE. Nueva reacción en cadena de la polimerasa múltiple para el diagnóstico específico de especies implicadas en la candidiasis humana. Biomédica [Internet]. [consultado el 17 de diciembre de 2023];37(2):200–8. Disponible en: https://www.redalyc.org/journal/843/84350981010/html/

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ALTERACIÓN EPIGENÉTICA DE LA INSUFICIENCIA CARDÍACA

Además las alteraciones de la expresión de los miARN afectan directamente a la expresión de los ARNm diana, ya que los miARN se expresan en cardiomiocitos, fibroblastos controlando al sistema cardiovascular a la vez el desequilibrio de los miARN son potencialmente causantes de la enfermedad. 

Imagen 1: Representación de los diferentes mecanismos de excreción (o secreción) de los miARN celulares. Disponible en:  https://dspace.uib.es/xmlui/bitstream/handle/11201/145985/Garcia_Jesus.pdf?sequence=1

Referencia bibliográfica 

1.   Chávez A, Co, Osmar C, Alfonso C, Antonio O. Esta obra está bajo una Licencia Creativa Comms Atribución 4.0 Internacional Rev salud pública Parag [Internet ].2020.[consultado el 10 de Diciembre de 2023 ];10(1 :74-9. Disponible en:  https://docs.bvsalud.org/biblioref/2020/04/1087935/pag-74-79.pdf

ALTERACIÓN EN LA TRADUCCIÓN DE LA ENFERMEDAD RENAL CRÓNICA

 La presencia de los miRNA participan en la regulación de las expresiones de proteínas una de sus funciones es inhibir la expresión de una proteína al unirse a la región 3' UTR del transcito, donde incia la degradación del ARNm e inhibe su traducción, su importancia radica en el diagnóstico de ERC.

Imagen 1: Daño vascular. Disponible en:  https://www.revistanefrologia.com/es-nuevos-mecanismos-implicados-el-desarrollo-articulo-S0211699522000704

Referencia bibliográfica: 

1. FiguerA,Alique M, Valera G, Serroukh N, Cepraín N, de Sequera P, etal. Nuevos mecanismos implicados en el desarrollo de la enfermedad cardiovascular en la enfermedad renal crónica. Nefrología.2022 abril.[consultado el 2 de diciembre del  2023]. Disponible: https://www.revistanefrologia.com/es-nuevos-mecanismos-implicados-el-desarrollo-articulo-S0211699522000704